第九章 尿液化学检查
考点：
·尿液酸碱度测定
·尿液蛋白质检查
·尿液糖检查
·尿液酮体检查
·尿液胆红素检查
·尿液尿胆原和尿胆素检查
·尿血红蛋白检查
·尿液本周蛋白检查
·尿液微量清蛋白测定
·尿液β2-微球蛋白测定
·尿液人绒毛膜促性腺激素检查
·尿液Tamm-Horsfall蛋白测定
·尿液α1-微球蛋白测定
·尿液纤维蛋白降解产物检查
·尿乳糜液和脂肪检查
·其他化学物质检查
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尿液酸碱度测定
（一）定义是反映肾脏调节机体内环境体液酸碱平衡能力的重要指标之一，通常简称为尿液酸度。尿液酸度分两种：可滴定酸度和真正酸度；前者可用酸碱滴定法进行滴定，相当于尿液酸度总量，后者是指尿液中所有能解离的氢离子浓度，通常用pH来表示。
（二）检测方法及评价
1.试带法：是目前最广泛应用的筛检方法。目前采用甲基红（pH4.6～6.2）和溴麝香草酚蓝（pH6.0～7.6）适量配合制成pH试带垫片，能反映尿液pH5.0～9.0的变异范围，基本可以满足临床对尿pH检查需要。
2.指示剂法：在洁净玻片上或试管内放入尿液少许，加溴麝香草酚蓝（BTB）溶液1滴，观察结果，显示黄色为酸性尿；显示蓝色为碱性尿；显示绿色为中性尿。BTB的pH变色范围为6.0～7.6；当尿液pH偏离范围时，检测结果不准确。本法受黄疸尿、血尿干扰。
3.滴定法：通常用0.1mol/L的标准氢氧化钠溶液，将一定量尿液标本滴定至pH7.4时，根据NaOH消耗的用量求得尿液可滴定酸度。本法可检查尿酸度总量，用于尿酸度的动态监测，但操作复杂。
4.pH计法：用pH电极能直接精确地测定出尿液的pH值。本法精确度较高，但需要特殊仪器，且操作更繁琐。
标本必须新鲜陈旧标本可因尿CO2挥发或细菌生长使pH增高，或因细菌和酵母菌作用，使尿中葡萄糖降解为酸和乙醇而pH减低。
试带法试带应能满足生理尿和病理尿pH变化范围，未被酸、碱污染，未吸潮变质。每月要用弱酸和弱碱检查试带灵敏度。
指示剂法一般指示剂多不易溶于水，配制指示剂溶液时，应先用少许碱液（如NaOH稀溶液）助溶后，再加蒸馏水稀释到适当浓度，以满足指示剂颜色变化范围，因为指示剂的解离质点状态与未解离质点状态呈现不同的颜色。
滴定法氢氧化物溶液浓度必须标准，经常新鲜配制；如放置时间过长，可因吸收空气中C02而影响滴定的准确性。
pH计法应经常校准pH计，确保仪器在正常良好状态下检测。
（三）参考值
在正常饮食条件下，晨尿多偏弱酸性，多数尿标本pH5.5～6.5，平均pH6.0。随机尿pH4.6～8.0。
（四）临床应用
1.生理性变化
（1）尿液pH易受食物影响：如进食含蛋白质高的食物过多或饥饿状态等，尿pH减低；而进食过多的蔬菜、水果等含碱性物质较多的食品时，尿pH增高。?
（2）进餐后尿pH增高：机体每次进餐后，尿液的pH呈一过性增高，称之为碱潮。
（3）剧烈运动、饥饿、出汗、应激状态等生理活动，夜间入睡后呼吸减慢，体内酸性代谢产物增多均可使尿液pH减低。许多药物也会影响尿液pH。尿内含有大量脓、血或细菌污染，分解尿素可使尿液碱化。
2.病理性变化
（1）尿pH减低见于酸中毒、慢性肾小球肾炎、发热、糖尿病、痛风、低血钾性碱中毒、白血病等。
（2）尿pH增高：见于呼吸性碱中毒、严重呕吐、尿路感染、肾小管性酸中毒、应用利尿剂等。
尿液蛋白质检查
（一）蛋白尿定义
尿液蛋白质检查是临床尿液常规化学检查之一。血浆流经肾小球时，仅有少量小分子量蛋白质通过肾小球滤过膜，中、大分子量的蛋白质不能滤过。原尿中的蛋白质绝大多数又被肾小管重吸收，故尿中只含有极微量的蛋白质，用常规化学定性方法常呈阴性。
尿液中蛋白质超过mg/24h或超过mg/L时，蛋白定性试验呈阳性，即称为蛋白尿。?
（二）检测方法及评价
1.尿蛋白定性试验为蛋白尿的过筛试验。?
（1）试带法：利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感，对球蛋白的敏感性仅为清蛋白1/～1/50，且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化，适于健康普查或临床筛检。
（2）加热乙酸法：为传统的经典方法。加热煮沸使蛋白变性、凝固，然后加酸使尿液pH接近尿蛋白质等电点（pH4.7），在含有适量无机盐状况下，蛋白质更易于变性下沉，同时可消除某些磷酸盐（如无定形磷酸盐、铵镁磷酸盐等）在碱性条件下易析出结晶、造成混浊的干扰。
加热—加酸—再加热
①在试管内加清晰尿液至管高2/3处，浑浊尿液标本应离心取上清液再试验。
②用木夹夹持（或手持）试管下1/3处，加热煮沸试管上1/3处内的尿液。
③将试管上部加热处尿液与试管下部未加热尿液比较，观察有无浑浊变化。
④在试管中加入5%冰乙酸2滴，再煮沸尿液，立即观察结果，结果的判断及报告形式同磺基水杨酸法。
（3）磺基水杨酸法：又称磺柳酸法。操作简便、反应灵敏、结果显示快，与清蛋白、球蛋白、糖蛋白和本周蛋白等均能发生反应；敏感度达0.05～0.1g/L，因而有一定的假阳性。被NCCLS作为干化学法检查尿蛋白的参考方法，并推荐为检查尿蛋白的确证试验。
根据反应的混浊程度，作出尿蛋白的定性或半定量判断：?阴性（－，不显浑浊，尿液外观仍清晰透明）；微量（±，轻微浑浊，隐约可见）；阳性（＋，明显白色浑浊，但无颗粒出现）；阳性（＋＋，稀薄乳样浑浊，出现颗粒）；阳性（＋＋＋，乳浊样，有絮片状沉淀）；阳性（＋＋＋＋，絮状浑浊，有大凝块下沉）。
2.尿蛋白定量试验：沉淀法、比色法、比浊法、染料结合法、免疫测定法和尿蛋白电泳法等。
沉淀法：需要特殊的器材，测定又费时，只能粗略估计测定结果，已被淘汰。
比浊法：常用磺基水杨酸一硫酸钠法。本法操作简便，但线性范围窄，受温度、pH、时间、混匀方式等多种因素影响，结果难准确，目前很少用。
比色法：常用双缩脲比色法，为蛋白质定量测定经典方法。本法显色稳定，对清蛋白、球蛋白的反应都有同样的灵敏度，但灵敏度低。
染料结合法：方法有考马斯亮蓝法、丽春红S法等。考马斯亮蓝染料易沉着在比色杯上，应注意洗脱。
免疫法及尿蛋白电泳法：具有更高的灵敏度和特异性，是发展应用的新技术。
（三）质量控制
1.试带法：必须使用标准合格的试带，并严格按照注意事项操作。
2.加热乙酸法：控制加酸量及盐类浓度，加酸过少、过多，导致远离蛋白质等电点时，可使阳性程度减弱。如尿液盐类浓度过低，又可致假阴性，此时可加饱和氯化钠溶液1～2滴后，再进行检查。?
3.磺基水杨酸法：使用某些药物（如青霉素钾盐、复方新诺明、对氨基水杨酸等）及有机碘造影剂时，以及尿内含有高浓度尿酸、草酸盐或黏蛋白时，可呈假阳性反应。此时，可通过加热煮沸后浊度是否消失予以鉴别。?
4.考马斯亮蓝法：尿蛋白测定应注意：①考马斯亮蓝试剂易吸附在比色杯上，每次使用后应立即用甲醇或乙醇或水加适量丙酮洗涤，并最好用专用比色杯。②试剂酸度对蛋白质测定影响较大，pH越高灵敏度越低。③考马斯亮蓝试剂必须新鲜，否则对蛋白质结合能力下降。④线性范围较窄。
（四）参考值
定性试验：阴性。
定量试验：＜0.1g/L；或＜0.15g/24h。
（五）临床应用
1.生理性蛋白尿
一般尿蛋白定性试验不超过（＋），定量＜0.5g/24h。
（1）功能性蛋白尿：见于剧烈运动后，发热、寒冷刺激、精神紧张、过度兴奋等，呈混合性蛋白尿，一般为2～3d后消退。
（2）直立性蛋白尿：又称为体位性蛋白尿。
可见于站立时间过长、“行军性”蛋白尿等，多见于青少年，绝大多数无肾病证据。
（3）其他生理性蛋白尿：如摄入性蛋白尿、偶然性蛋白尿、老年性蛋白尿、妊娠性蛋白尿等。
2.病理性蛋白尿
（1）肾前性蛋白尿（溢出性蛋白尿）
见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、浆细胞白血病、阵发性睡眠性血红蛋白尿、挤压伤综合征、电灼伤、多发性肌炎，进行性肌肉萎缩、急性单核细胞白血病尿溶菌酶增高，胰腺炎严重时尿淀粉酶增高等。
（2）肾性蛋白尿
1）肾小球性蛋白尿：肾病综合征：蛋白尿以清蛋白为主，及少量相对分子质量小的蛋白质，定性试验多数为3＋～4＋，定量试验常为3.5～10g/d，最多可达20g/d。
原发性肾小球肾炎：如急性肾炎、慢性肾炎、膜性肾炎、膜增生性肾炎、肾功能衰竭等。
继发性肾小球疾病：如糖尿病肾病、狼疮性肾炎、妊娠中毒症等。?
2）肾小管性蛋白尿：可见于肾小管间质病变、重金属中毒、药物中毒、器官移植等。
（3）肾后性蛋白尿：可见于泌尿、生殖系炎症反应；泌尿系结石、结核、肿瘤；泌尿系邻近器官疾病等。
尿液糖检查
（一）定义
正常人尿液几乎不含或仅含微量葡萄糖，一般尿糖定性试验为阴性。当血糖浓度超过肾糖阈（＞8.88mmol/L）或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性试验呈阳性，称为糖尿。
（二）检测方法及评价
1.试带法用葡萄糖氧化酶法。试带色原物质不同，方法也不尽相同，大多数试带法不与乳糖、半乳糖、果糖及还原物质发生反应。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速，适用于自动化分析。
2.薄层层析法操作复杂、费时、成本高，多用于临床或基础研究，临床上一般情况少用。
3.班氏法（Benedict法）利用葡萄糖的还原性而设计，是传统尿糖定性试验的方法。取班氏试剂1ml于试管中，加热煮沸，若不变色，则可加入尿液（0.1ml），再煮沸1～2min，冷却后观察结果。班氏法是非特异性测定葡萄糖的试验，可检出多种尿糖，如乳糖、果糖、戊糖等。本法简便，但易受其他还原物质干扰。
（三）质量控制
1.容器清洁不含氧化性物质如漂白粉、次亚氯酸等，否则易导致班氏法假阴性而试带法假阳性。
2.及时送检尿液必须新鲜，若长时间放置，细菌繁殖等可造成假阴性结果。
3.排除维生素C干扰维生素C可使班氏法呈假阳性，使试带法呈假阴性。
4.高比密尿及高酮体尿可使试带法糖定性呈假阴性。
5.班氏试验必须首先煮沸班氏试剂，避免试剂变质。
（四）参考值定性试验：阴性。
（五）临床意义
糖尿-葡萄糖尿
1.血糖增高性糖尿：①糖尿病；②摄入性糖尿；③应激性糖尿；④其他内分泌异常如甲状腺功能亢进、肢端肥大症、嗜铬细胞瘤、库欣综合征等。
2.血糖正常性糖尿：又称肾性糖尿，出现糖尿的原因是由于肾小管对滤过液中葡萄糖重吸收能力减低，肾糖阈减低所致的糖尿。
①家族性肾性糖尿；
②新生儿糖尿；
③后天获得性肾性糖尿；
④妊娠期或哺乳期妇女。
下列说法中不正确的是
A.陈旧尿标本CO2挥发或细菌生长pH可能增高?
B.陈旧尿标本细菌和酵母菌作用，pH可能减低?
C.进食含蛋白质高的食物过多，尿pH增高?
D.进食含碱性食物过多，尿pH增高?
E.当机体每次进餐后，尿液的pH呈一过性增高
??
『正确答案』C
『答案解析』尿液pH易受食物影响：如进食含蛋白质高的食物过多或饥饿状态等，尿pH减低；而进食过多的蔬菜、水果等含碱性物质较多的食品时，尿pH增高。
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蛋白尿是指24小时尿液内蛋白质排出量超过
A.50mg
B.mg
C.mg
D.mg
E.mg
??
『正确答案』C
『答案解析』尿液中蛋白质超过mg/24h或超过mg/L时，蛋白定性试验呈阳性，即称为蛋白尿。?
?
尿蛋白试带法对哪种蛋白质最敏感
A.β2-微球蛋白?
B.IgG?
C.IgE?
D.清蛋白?
E.黏蛋白?
??
『正确答案』D
『答案解析』试带法：利用pH指示剂的蛋白误差原理。本法对清蛋白较敏感，对球蛋白的敏感性仅为清蛋白1/～1/50，且可漏检本周蛋白。尿液pH值增高也可产生假阳性。本法快速、简便、易于标准化，适于健康普查或临床筛检。
?
尿加热乙酸法进行尿蛋白定性为+++，结果判断正确的是
A.不显浑浊，尿液外观仍清晰透明
B.明显白色浑浊，但无颗粒出现
C.稀薄乳样浑浊，出现颗粒
D.乳浊样，有絮片状沉淀
E.絮状浑浊，有大凝块下沉
??
『正确答案』D
『答案解析』此反应的结果的判断及报告形式同磺基水杨酸法。根据反应的混浊程度，作出尿蛋白的定性或半定量判断：阴性（－，不显浑浊，尿液外观仍清晰透明）；微量（±，轻微浑浊，隐约可见）；阳性（＋，明显白色浑浊，但无颗粒出现）；阳性（＋＋，稀薄乳样浑浊，出现颗粒）；阳性（＋＋＋，乳浊样，有絮片状沉淀）；阳性（＋＋＋＋，絮状浑浊，有大凝块下沉）。
?
肾前性蛋白尿的常见疾病，不包括
A.多发性骨髓瘤?
B.巨球蛋白血症?
C.浆细胞白血病?
D.生殖系炎症?
E.进行性肌肉萎缩?
??
『正确答案』D
『答案解析』生殖系炎症属于肾后性蛋白尿。
?
尿葡萄糖试带法产生假阴性反应常见的干扰物是
A.氧化物?
B.氨水?
C.维生素C?
D.青霉素?
E.链霉素?
??
『正确答案』C
『答案解析』维生素C可使班氏法呈假阳性，使试带法呈假阴性。
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下列何种试验可特异性地检出尿中的葡萄糖
A.Benedict法
B.Rubner法
C.Bial法
D.Seliwanoff法
E.葡萄糖氧化酶法
??
『正确答案』E
『答案解析』用葡萄糖氧化酶法检查尿糖。本法检测葡萄糖的特异性强、灵敏度高、简便快速，适用于自动化分析。
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B1型题
A.尿蛋白?
B.尿糖?
C.尿胆红素?
D.尿酮体?
E.尿隐血
1.加热乙酸法可用于测定（ ）
??
『正确答案』A
『答案解析』加热乙酸法可用于测定尿蛋白。
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2.丽春红S法可用于测定（ ）
??
『正确答案』A
『答案解析』丽春红S法可用于测定尿蛋白。
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3.磺基水杨酸法用于测定（ ）
??
『正确答案』A
『答案解析』磺基水杨酸法用于测定尿蛋白。
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尿液酮体检查
（一）定义
尿酮体是尿液中乙酰乙酸（占20%）、β-羟丁酸（占78%）及丙酮（占2%）的总称。
酮体是机体脂肪氧化代谢产生的中间代谢产物，当糖代谢发生障碍、脂肪分解增高，酮体产生速度超过机体组织利用速度时，可出现酮血症，酮体血浓度一旦越过肾阈值，就产生酮尿。
（二）检测方法及评价
1.试带法：基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法，是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速，尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。
2.湿化学法
（1）Rothera法：在碱性条件下，亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色，但不与β-羟丁酸起反应。
（2）Gerhardt法：高铁离子（Fe3＋）与乙酰乙酸的烯醇式基团发生螯合，形成酒红色复合物。本法只对乙酰乙酸反应。
3.片剂法基于亚硝基铁氰化钠法。
（三）质量控制
1.由于标本中的丙酮和乙酰乙酸具有挥发性及试剂的不稳定性，尿酮体的检测方法均可产生假阴性结果，因此，新鲜尿标本以及阴性和阳性对照是获得可靠结果的重要保证。
2.大量细菌繁殖可使乙酰乙酸转变为丙酮，室温保存，丙酮易丢失，密闭冷藏可避免挥发，但试验时标本应置于室温中恢复温度后再检测。
（四）参考值定性：阴性。
（五）临床应用
1.糖尿病酮症酸中毒
（1）尿酮体检查有助于糖尿病酮症酸中毒早期诊断（尿酮体阳性），并能与低血糖、心脑疾病乳酸中毒或高血糖高渗透性糖尿病昏迷相区别（尿酮体阴性）。
（2）治疗监测：糖尿病酮症酸中毒早期病例中，主要酮体成分是β-羟丁酸（一般试带法无法测定），而乙酰乙酸很少或缺乏，此时测得结果可导致对总酮体量估计不足。当糖尿病酮症酸中毒症状缓解之后，β-羟丁酸转变为乙酰乙酸，反而使乙酰乙酸含量比急性期早期增高，此时易造成对病情估计过重。因此，必须注意病程发展，并与临床医生共同分析测定结果。当多次检测尿酮体均为阴性时，可视为疾病好转。
（3）新生儿：出现尿酮体强阳性，应怀疑为遗传性疾病。
2.非糖尿病性酮症者
如应激状态、剧烈运动、饥饿、禁食过久、饮食缺乏糖类或为高脂肪，感染性疾病如肺炎、伤寒、败血症、结核等发热期，严重腹泻、呕吐包括妊娠反应性、全身麻醉后等均可出现酮尿。
3.中毒如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等。服用双胍类降糖药（如降糖灵）等，由于药物抑制细胞呼吸，可出现血糖减低而尿酮体阳性的现象。
尿液胆红素检查
（一）概述?
成人每日产生的胆红素约75%来自衰老红细胞中血红蛋白的分解，25%主要来自骨髓内未成熟红细胞的分解及其他非血红蛋白的血红素分解产物。
血浆中有3种胆红素：未结合胆红素（UCB），结合胆红素（CB），δ-胆红素。
UCB不溶于水，在血中与蛋白质结合不能通过肾小球滤膜。UCB入肝后在葡萄糖醛酸转移酶作用下形成胆红素葡萄糖醛酸，即为结合胆红素。CB相对分子质量小，溶解度高，可通过肾小球滤膜由尿中排出。δ-胆红素的反应性与结合胆红素相似，但它是未结合胆红素与清蛋白通过非酶促反应形成的共价结合物，通常在血浆中含量很低。正常人血中CB含量很低，滤过量极少，尿液胆红素常用检查方法为阴性；当血中CB增高超过肾阈值时，CB即从尿中排出，尿胆红素试验可呈阳性反应。
（二）检测方法及评价
1.重氮法在强酸介质中结合胆红素与二氯苯胺重氮盐起偶联反应，生成红色的复合物。多用此原理，操作简单，且可用于尿自动化分析仪，目前多用此法作定性筛检试验，如果反应不典型，应进一步分析鉴定。
2.氧化法①Smith碘环法：最为简单，但灵敏度低，目前已少用。②Harrison法：操作繁琐，但灵敏度较高。取尿液5ml，加入约2.5mlg／L氯化钡溶液，混匀，出现白色的硫酸钡沉淀，然后离心弃去上清液，向沉淀物加入酸性三氯化铁溶液数滴，若呈绿色或蓝绿色者为阳性。反应前加入吸附剂，提高了灵敏度。
（三）质量控制
胆红素在阳光照射下易转变为胆绿素，因此应用避光棕色容器，采集新鲜尿标本。维生素C、亚硝酸盐和某些药物，可引起假阴性结果。
（四）参考值定性：阴性。
（五）临床意义?
主要用于黄疸的诊断和黄疸类型的鉴别诊断。
1.阻塞性黄疸
尿胆红素阳性。见于胆石症、胆管癌、胰头癌、原发性胆汁性肝硬化、门脉周围炎、纤维化及药物所致胆汁淤滞等。
2.肝细胞性黄疸
尿胆红素阳性。见于急性黄疸性肝炎、病毒性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、败血症等。
3.溶血性黄疸尿胆红素阴性。
4.先天性高胆红素血症由于肝细胞对胆红素的摄取、结合和排泄缺陷所致的黄疸，尿胆红素阳性。
尿液尿胆原和尿胆素检查
（一）概述
结合胆红素经胆管排入肠道后，被肠道细菌氧化为尿胆原，从粪便中排出为粪胆原。大部分尿胆原从肠道重吸收经肝转化为结合胆红素再排入肠腔，小部分尿胆原进入血液由尿中排出。无色尿胆原经空气氧化及光线照射后转变成黄色的尿胆素。
尿胆红素、尿胆原及尿胆素，俗称尿三胆。由于送检的标本多为新鲜尿标本，尿胆原尚未氧化成尿胆素，故一般检查胆红素和尿胆原，俗称尿二胆。
（二）检测方法
1.尿胆原
（1）湿化学Ehrlich法：尿胆原在酸性溶液中，与对二甲氨基苯甲醛（Ehrlich试剂）反应，生成樱红色化合物。具体操作是：于试管中加新鲜尿液5ml，加Ehrlich试剂0.5ml，混匀，室温下反应10min，在白色背景下，直持试管，从管口向管底观察反应的色泽，如为阴性，可直接报告结果；如呈阳性反应，需将尿液稀释后继续试验，报告出现阳性的最高稀释倍数。?
（2）试带法：检测原理基于Ehrlich法。可用于定性和定量，测试灵敏度依试剂带不同而有所差异。
2.尿胆素采用湿化学Schleisinger法。
质量控制
1.尿胆原排出后易氧化为尿胆素，故应以新鲜尿作及时检查，否则导致结果假阴性。维生素C等还原性物质易抑制Ehrlich法检测尿胆原。
2.如尿中含有结合胆红素，加Ehrlich试剂后显绿色，干扰尿胆原检测。可加氯化钡溶液吸附胆红素，离心沉淀后用上清进行Ehrlich试验。
3.尿胆原排出量每天波动很大，夜间和上午量少，于午后2～4h达高峰，同时尿胆原的清除与尿pH相关。嘱患者服碳酸氢钠，碱化尿液，收集午后2～4h排出的尿液进行测定，可提高尿胆原检出的阳性率。
（三）参考值?
尿胆原定性：阴性或弱阳性（1:20稀释后阴性）。?
尿胆素定性：阴性。
尿血红蛋白检查
（一）概述人血浆中仅有微量血红蛋白，与结合珠蛋白形成复合物，在单核-巨噬细胞系统代谢，尿中无游离血红蛋白。当有血管内溶血时，红细胞破坏，血红蛋白释放入血液形成血红蛋白血症。若血红蛋白超过结合珠蛋白所能结合的量，则血浆存在大量游离血红蛋白，当其量超过0mg/L时，血红蛋白可随尿液排出。其特点为外观呈浓茶色、红葡萄酒色或酱油色，隐血试验阳性。
（二）检测方法及评价
1.化学法血红蛋白的亚铁血红素具有弱过氧化物酶样活性，可催化过氧化氢和色原的反应，使后者氧化呈色，其色泽的深浅与尿中的血红蛋白（或红细胞量）成正比。常用的方法有邻联甲苯胺法、氨基比林法等，本法操作简单，但试剂稳定性差，特异性较低；尿液中混入铁盐、硝酸、铜、锌、碘化物等均可使结果呈假阳性；尿液中含有过氧化物酶或其他对热不稳定酶也可呈假阳性。
2.试带法检测原理基于传统的湿化学法。基本克服了湿化学法试剂不稳定的弱点，但尿液中含有对热不稳定酶、尿液被氧化剂污染或尿路感染时某些细菌产生过氧化物酶，可致结果呈假阳性；大剂量的维生素C或其他还原物质导致假阴性。甲醛可使反应假阴性，大量亚硝酸盐则可延迟反应。试带法除与游离血红蛋白反应外，也与完整的红细胞反应，但在高蛋白、高比密尿液中，RBC不溶解，试带灵敏度减低。
3.胶体金单克隆抗体法采用胶体金标记的抗人血红蛋白的单克隆抗体法测定尿液中血红蛋白。本法灵敏度高、特异性强、操作快速、使用方便，基本克服了化学试带法缺点。
质量控制
1.尿液标本应新鲜。长时间放置可因细菌繁殖造成假阳性，或因红细胞破坏导致试带法与显微镜检查法的差异。
2.湿化学法所用试剂必须新鲜配制3%过氧化氢，设阳性对照。为防止假阳性，可将尿液煮沸2min，破坏尿白细胞过氧化物酶或其他易热性触酶。
3.试带法试带要干燥、避光保存。
4.胶体金单克隆抗体法如怀疑尿标本血红蛋白浓度过高，可将尿液稀释后再测定，以避免抗原过剩而出现的假阴性现象。
（三）参考值阴性。
（四）临床应用尿血红蛋白检查，主要用于辅助诊断泌尿系统疾病和血管内溶血性疾病。
尿液本周蛋白检查
（一）概述?本周蛋白（BJP）是游离的免疫球蛋白轻链，能自由通过肾小球滤过膜，当浓度增高超过近曲小管重吸收的极限时，可自尿中排出，即本周蛋白尿。?
BJP在pH4.9±0.1条件下，加热至40～60℃时可发生凝固，温度升至90～℃时可再溶解，而温度减低至56℃左右，又可重新凝固，故又称为凝溶蛋白。
（二）检测方法及评价
1.热沉淀-溶解法
基于BJP在56℃凝固、℃溶解的特性而设计。本法特异性较高，操作简便但费时，要求标本量较大，灵敏度不高，致使假阴性率高。操作时须注意：①标本新鲜，否则因清蛋白、球蛋白分解变性而干扰试验。②尿液混浊时需离心取上清液。③若为蛋白尿，须先用加热乙酸法沉淀普通蛋白质，然后趁热过滤，取上清液检查。④BJP过多，90℃以上不易完全溶解，需与对照管比较，也可将尿液稀释后再测。
2.对-甲苯磺酸法基于对-甲苯磺酸法能沉淀相对分子质量较小的BJP，而与相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应的原理而测定。
本法操作简便、灵敏度高，但特异性较差。尿中有清蛋白时不产生沉淀反应，若球蛋白大于5g/L可呈假阳性。是较敏感的筛检试验方法。
3.蛋白电泳法
经乙酸纤维素膜电泳，BJP可在α2至γ球蛋白区带间出现“M”带，但如尿中BJP含量较低，需预先浓缩1O～50倍。
4.免疫电泳
5.免疫固定电泳
6.免疫速率散射浊度法
（三）参考值阴性。
（四）临床意义
检测尿BJP，主要用于诊断和鉴别诊断多发性骨髓瘤、原发性淀粉样变性、巨球蛋白血症及其他恶性淋巴增殖性疾患。
尿液微量清蛋白测定
（一）概述微量清蛋白尿是指尿液中清蛋白超过正常水平、但低于常规试带法可检出的范围。微量清蛋白尿是早期糖尿病肾病的临床主要征象。
（二）检测方法及评价?
多采用免疫学方法，如放射免疫法（RIA）、酶联免疫法（ELISA）、免疫浊度法等。
灵敏度高，特异性强，精密度高，准确性好。
（三）参考值?
成人：（1.27±0.78）mg/mmolCr或（11.21±6.93）mg/gCr
AER：5～30mg/24hAER（尿液白蛋白排泄率）
（四）临床意义
尿微量清蛋白检测主要用于早期肾损害的诊断，尤其当尿清蛋白排泄率持续超过20μg/min尿，常作为糖尿病、系统性红斑狼疮等全身性疾病早期肾损害的敏感指标。
尿液蛋白电泳
（一）检测方法及评价
尿蛋白电泳常用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS-PAGE），亦称尿蛋白SDS盘状电泳。本法是目前分析蛋白质亚基组成和测定其相对分子质量的最好方法。
（二）参考值各相对分子质量的尿蛋白均显示微量蛋白区带，但以清蛋白区带为主。
（三）临床意义尿蛋白电泳主要用于蛋白尿的分型。
1.低相对分子质量蛋白尿见于以肾小管损害为主的疾病，如急性肾盂肾炎、肾小管性酸中毒、慢性间质性肾炎早期、重金属及药物引起肾损害等。
2.中及高相对分子质量蛋白尿见于以肾小球损害为主的疾病，如各类原发性、继发性肾小球肾炎、肾病综合征等。
3.混合性蛋白尿见于整个肾单位受损的病理情况，如慢性肾炎晚期、严重间质性肾炎累及肾小球，以及各种病因引起的慢性肾衰竭等。
目前常用尿酮体的筛检方法是
A.试带法
B.Rothera法
C.Gerhardt法
D.片剂法
E.滴定法
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『正确答案』A
『答案解析』试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法，是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速，尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。
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确证尿胆红素的检测方法是
A.Smith法
B.Harrison法
C.Rothera法
D.干化学试带法
E.泡沫试验
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『正确答案』B
『答案解析』Harrison法：操作繁琐，但灵敏度较高。是确证尿胆红素的测定方法。
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患阻塞性黄疸时，尿中胆红素会
A.阴性
B.正常
C.增加
D.减少
E.不定
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『正确答案』C
『答案解析』阻塞性黄疸时，尿中胆红素阳性。
红素溶黄阴，肝阻黄疸为阳性。
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尿三胆是指
A.尿胆原、尿胆素、粪胆素
B.粪胆原、胆绿素、胆红素
C.胆红素、尿胆原、尿胆素
D.粪胆素、尿胆素、粪胆原
E.胆红素、胆绿素、尿胆原
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『正确答案』C
『答案解析』尿胆红素、尿胆原及尿胆素，俗称尿三胆。由于送检的标本多为新鲜尿标本，尿胆原尚未氧化成尿胆素，故一般检查胆红素和尿胆原，俗称尿二胆。
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尿本周蛋白灵敏度高的筛查方法是
A.试纸法
B.加热凝固法
C.对甲苯磺酸法
D.醋酸法
E.磺柳酸法
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『正确答案』C
『答案解析』对-甲苯磺酸法：基于对-甲苯磺酸法能沉淀相对分子质量较小的BJP，而与相对分子质量较大的清蛋白和球蛋白不起反应的原理而测定。本法操作简便、灵敏度高，但特异性较差。尿中有清蛋白时不产生沉淀反应，若球蛋白大于5g/L可呈假阳性。是较敏感的筛检试验方法。
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B1型题
A.尿卟啉
B.尿本周蛋白
C.尿胆红素?
D.尿胆原
E.尿肌红蛋白
1.Ehrlich试验用于测定（ ）
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『正确答案』D
『答案解析』湿化学Ehrlich法：尿胆原在酸性溶液中，与对二甲氨基苯甲醛（Ehrlich试剂）反应，生成樱红色化合物。
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2.Harrison用于测定（ ）
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『正确答案』C
『答案解析』Harrison法：操作繁琐，但灵敏度较高。是确证尿胆红素的测定方法。
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3.饱和硫酸铵法用于测定（ ）
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『正确答案』E
『答案解析』80%饱和硫酸铵法：在80%饱和硫酸铵浓度下，Mb溶解，而Hb和其他蛋白沉淀。故在尿液中加入试剂分离Mb，再进行隐血试验，若阳性，则为Mb尿。本法操作较麻烦，灵敏度较差。
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尿液肌红蛋白检查
（一）概述肌红蛋白（Mb）是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素单链的蛋白质，其结构及特性与血红蛋白相似。当肌肉组织受损伤时，Mb可大量释放至细胞外进入血液循环，因其相对分子质量较小，可迅速通过肾小球滤过而由肾脏排出。尿Mb检查阳性，称肌红蛋白尿，其外观呈深红色、不透明的酱油色、深褐色等，镜检无红细胞，但隐血试验阳性。
（二）检测方法及评价
1.隐血试验（OBT）法Mb具有过氧化物酶样活性，能用尿隐血试验方法检出。
2.80%饱和硫酸铵法在80%饱和硫酸铵浓度下，Mb溶解，而Hb和其他蛋白沉淀。故在尿液中加入试剂分离Mb，再进行隐血试验，若阳性，则为Mb尿。本法操作较烦琐，灵敏度较差。
3.单克隆抗体免疫法是最敏感特异的方法，既可作为确证实验又可进行尿中肌红蛋白定量分析，尤其对急性心肌梗死的肌红蛋白尿检查有重要临床价值。
（三）参考值定性：阴性。
（四）临床意义Mb尿见于：阵发性肌红蛋白尿、创伤、组织局部缺血、代谢性Mb尿、原发性（遗传性）肌肉疾病等。
尿液β2-微球蛋白测定
（一）概述β2-微球蛋白（β2-M）的相对分子质量仅，是体内除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞外，所有细胞特别是淋巴细胞和肿瘤细胞膜上人类白细胞抗原的轻链蛋白组分，因电泳时出现β2区带而得名。
因其相对分子质量小且不和血浆蛋白结合，可自由地经肾小球滤入原尿，其中99.9%由近端肾小管以胞饮形式重吸收，并在肾小管上皮细胞中分解破坏，因此，仅有微量β2-M自尿中排出。
（二）检测方法?β2-M为肾小管性蛋白尿，用试带法筛检常为阴性，用加热乙酸法可为阳性。
定量测定可用下列方法：
1.特定蛋白检测仪法采用速率散射比浊法原理。检测速度快、灵敏度、精确度高、稳定性好。
2.酶联免疫吸附法灵敏度和特异性高。测定简便，但受酶活性、温度、测定系统pH、离子强度等影响。
3.放射免疫法灵敏度、精密度、准确度高，特异性强。但核素放射性对人体有一定危害性，必须加以防护。
质量控制
1.标本处理β2-M在pH5以下的酸性尿中极易分解破坏，故尿液标本收集后应及时测定。若需贮存批量检测，应将尿液调节至pH6.5～7.0，冷冻保存。
2.试剂要妥善保管每批测定应有合格质控品。
（三）临床意义
尿β2-M检测主要用于评估肾脏早期损伤时肾小球和近端肾小管功能。
尿液人绒毛膜促性腺激素（hCG）检查
（一）概述?由胎盘合体滋养细胞分泌的一种具有促进性腺发育的糖蛋白激素。hCG存在于孕妇的血液、尿液、初乳、羊水和胎儿体内。在受精后第6d受精卵滋养层形成时，开始分泌微量的hCG；受精卵着床后，采用特异性β-hCG抗血清能在母体血液中检测出hCG。在妊娠早期hCG分泌量增高极快，大约1.7～2.0d即可增高1倍，至妊娠8～10周时血清浓度达到高峰，持续1～2周后迅速减低，妊娠晚期血清hCG浓度仅为峰值的10%，持续至分娩。hCG是唯一不随胎盘重量增加而分泌增多的胎盘激素，分泌后直接进入母血，几乎不进入胎血循环。hCG可通过孕妇血液循环而排泄到尿液中，血清hCG浓度略高于尿液，且呈平行关系。
hCG是由两个独立的非共价键相连的肽链（α亚基和β亚基）组成的糖蛋白激素，单个亚基不具有生物学活性，当其连接成完整的化合物时才具有活性。hCGα亚基的氨基酸数量及其排列顺序与卵泡刺激素（FSH）、黄体生长激素（LH）、促甲状腺激素（TSH）的亚基几乎相同，故hCGα亚基抗体均能与FSH、LH、TSH的α亚基发生交叉反应。
hCGβ亚基羧基端最后的28～32个氨基酸为其所特有，不存在于其他糖蛋白激素中，从而决定了其生物学活性及免疫学的高度特异性。因此，临床上均采用高效的抗hCGβ亚基单克隆抗体检查hCG。近年来，也采用抗β-hCG羧基末端肽单克隆抗体，以进一步提高hCG检查的灵敏度和特异性。
（二）检测方法及评价
检测hCG的方法很多，目前临床上主要采用免疫学方法，如单克隆抗体胶体金试验、ELISA法、电化学发光免疫法、放射免疫试验、检孕卡法、胶乳凝集抑制试验、血凝抑制试验等。免疫学方法操作简单、快速，灵敏度高，其检测手段不断更新，正向着特异、快速、简便、敏感、普及的方向发展。
单克隆抗体胶体金试验检测时，将试带条浸入被检尿液中（液面要低于两条抗体线）后迅速取出，尿液沿试带继续上行，尿液中β-hCG在上行过程中与金标记β-hCG单克隆抗体结合，当行至羊抗人hCG抗体线时，形成金标记的β-hCG单克隆抗体-尿hCG-羊抗人hCG多抗复合物，在试带上显示紫红色线条。结果判断：在质控点和测定点各呈现红色为阳性；仅在质控点呈红色为阴性。若质控点和测定点均不呈现红色，表示试剂失效。单克隆抗体胶体金检测试剂盒有薄膜渗滤法（呈现2个红色斑点）和试带法（呈现2条红杠），灵敏度约为0.8～2.0ng/L，可半定量，广泛应用于临床和家庭。
酶联免疫吸附剂试验（ELISA）操作简便、灵敏度高，为hCG检查的早期筛检试验，可半定量。由于采用了hCG特异性的抗β-hCG单克隆抗体，故特异性高。此法与黄体生成素、卵泡刺激素等无交叉反应。
（三）质量控制
1.标本采集与处理
宜采集首次晨尿（中段尿）ml，离心取上清液用于检查。若为蛋白尿、血红蛋白尿，应加热煮沸3min后，离心取上清液检查。不宜使用严重的血尿、菌尿标本。
2.检验过程每批试验均应设定阳性对照和阴性对照。
3.假阳性尿中LH、FSH、TSH等，可与hCG产生试验的交叉反应，呈现假阳性。为避免假阳性：①尽量采用单克隆抗体二点酶免疫法，减低交叉反应。②应在排卵期或排卵后3d，留尿检查。③对双侧卵巢切除的患者，可肌注丙酸睾酮，使LH下降，再留尿检查。
（四）参考值定性：阴性。定量：＜25IU/L。
（五）临床意义
1.早期妊娠诊断
妊娠后尿液hCG增高，一般妊娠后35～40d时，hCG为ng/L以上；60～70d出现高峰，hCG可达6.4～25.6μg/L，常用的hCG检查方法即能显示阳性结果，单克隆抗体二点酶免疫法在受精卵着床后5～7d即能检测出hCG。
2.流产诊断和监察
①先兆流产：尿液hCG仍维持在高水平一般不会发生难免流产，如hCG在ng/L以下并逐渐减低，则有流产或死胎的可能。
②不全流产：不全流产时，宫腔内尚有残留的胎盘组织，hCG检査仍可呈阳性；完全流产或死胎时hCG由阳性转为阴性。
3.异位妊娠的诊断异位妊娠时，只有60%～80%患者hCG呈阳性，但hCG阴性者仍不能完全排除异位妊娠。
4.妊娠滋养细胞疾病的诊断与病情观察①葡萄胎、侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌等妊娠滋养细胞疾病患者，血清及尿液中hCG明显增高，hCG浓度往往明显大于正常妊娠月份值。②正常妊娠时，hCG峰值在停经后60～70d，可能与葡萄胎发病时间同期，而造成诊断困难。若连续测定hCG或与B超检查同时进行，即可作为鉴别。③葡萄胎清除后12～16周，hCG转为阴性；若hCG减低缓慢或减低后又上升，或12～16周后仍未转为阴性者，则提示有妊娠滋养细胞肿瘤的可能。④妊娠滋养细胞肿瘤患者术后3周，hCG应小于4ng/L，8～12周呈阴性；如hCG不减低或不转阴性，提示可能有残留病灶，应定期检查，以预防复发。
5.其他畸胎瘤、睾丸间质细胞癌、肺癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、子宫颈癌等患者血液和尿液中hCG也明显增高。
尿液Tamm-Horsfall蛋白测定
检测尿液中THP的临床意义主要有：①作为远端肾小管病变定位标志物。②THP持续维持较高水平提示易于形成尿结石，并有助手判断泌尿道结石患者体外震波碎石治疗效果。
尿液α1-微球蛋白测定
检测尿液α1-微球蛋白的临床意义主要有：①尿α1-M增高：是反映和评价各种原因包括肾移植后排斥反应所致早期近端肾小管功能损伤的特异、灵敏指标。与β2-M相比较，α1-M不受恶性肿瘤的影响，酸性尿中不会出现假阴性，故结果更为可靠。②评估肾小球滤过功能。
尿液纤维蛋白降解产物检查
检测尿液FDP的临床意义主要有：①原发性肾小球疾病时，尿FDP阳性并进行性增高，提示肾小球内有局部凝血、微血栓形成和纤溶变化。②弥散性血管内凝血、原发性纤溶性疾病、泌尿系统感染、肾移植排斥反应、肾肿瘤时，尿液FDP含量增高。
尿乳糜液和脂肪检查
（一）概述尿液中混有淋巴液而呈稀牛奶状称乳糜尿，若同时混有血液称乳糜血尿；尿液中出现脂肪小滴则称脂肪尿。
乳糜尿形成机制：从肠道吸收的乳糜液未经正常的淋巴道引流入血而逆流至泌尿系淋巴管中，引起该处淋巴管内压力增高、曲张破裂，乳糜液流入尿中所致。
（二）检测方法及评价
1.有机溶剂抽提法
2.离心沉淀法
关于尿液肌红蛋白的叙述，错误的是
A.主要用于鉴别肌肉是否发生损伤?
B.镜检无红细胞，但隐血试验阳性?
C.硫酸铵法的特异性和灵敏度高?
D.单克隆抗体免疫法是最敏感、特异的方法?
E.肌红蛋白具有过氧化物酶样活性，能用尿隐血试验方法检出?
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『正确答案』C
『答案解析』80%饱和硫酸铵法：在80%饱和硫酸铵浓度下，Mb溶解，而Hb和其他蛋白沉淀。故在尿液中加入试剂分离Mb，再进行隐血试验，若阳性，则为Mb尿。本法操作较烦琐，灵敏度较差。
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近端肾小管功能检测的指标有
A.微量清蛋白?
B.视黄醇结合蛋白?
C.β2-微球蛋白?
D.凝溶蛋白?
E.γ球蛋白
??
『正确答案』C
『答案解析』因其相对分子质量小且不和血浆蛋白结合，可自由地经肾小球滤入原尿，其中99.9%由近端肾小管以胞饮形式重吸收，并在肾小管上皮细胞中分解破坏，因此，仅有微量β2-M自尿中排出。β2-M为肾小管性蛋白尿。
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妊娠尿中绒毛膜促性腺激素浓度达到高峰的时间是
A.1周
B.2周
C.4周
D.5周
E.10周
??
『正确答案』E
『答案解析』在妊娠早期hCG分泌量增高极快，大约1.7～2.0d即可增高1倍，至妊娠8～10周时血清浓度达到高峰，持续1～2周后迅速减低，妊娠晚期血清hCG浓度仅为峰值的10%，持续至分娩。
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